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阅读次数:1072 发布时间:2013/10/25 10:10:56
我们常说到的elisa就是是酶联接免疫吸附剂测定,它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。而在elisa实验中常常会出现一些问题,那么今天我们就来说在elisa实验中*可能出现的问题以及解决的方法。
我们在试验中可能会出现所有孔都没有显色,那么原因就有可能是微孔加入抗体后,洗板不彻底,微孔中存在游离的抗体。也可能是用错试剂。您在想想是不是在操作中忘记加酶或抗体。
所有孔都没有显色的问题解决方法:
1、检查洗板器械,比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加样前,要看清瓶签。
3、严格按说明书操作步骤进行实验,确保每步都到位。
您有没有遇见过所有孔显色偏低的现象?那么气原因就有可能是微孔加入抗体后,洗板不彻底,微孔中存在游离的抗体。或者是洗板不干净。抗体污染了酶结合物等其它试剂。温度没达到要求也会受到相应的实验影响。还有可能是每孔加入的试剂量低于说明书要求量。
所有孔显色偏低的问题解决办法:
(1)手工加蒸馏水洗板时,要避免吸头接触微孔,常更换新的蒸馏水。
(2) 洗板时要确保每孔都注满蒸馏水(约400ul),且至少洗板五次。
(3)严格按说明书要求操作,每次取样要更换吸头。
(4) 控制孵育温度在25℃。
(5) 加样器吸头安放牢固避免吸样不足,加样时务必将吸头内液体打尽。
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