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阅读次数:825 发布时间:2022/5/11 10:39:34
1. 规范加样:不规范的移液操作可能带来0.1%到5%的移液误差,甚至更高!
a. 移液器定期校准:选择密封性好质量可靠的吸头,吸量不准确,直接影响检测结果;
b. 加样,溶液充分混匀,垂直悬空加入液体,避免加在孔壁上,不可产生气泡;
c. 加样时避免液体溅出,如有样本溅出,应用吸水纸轻轻拭干,并做相应记录;
d. 如果加样枪漏气以至于加样的量不够,不能用枪吸出再加,做相应记录实验;
e. 每次加样顺序一致,尤其底物、终止液顺序一致,保证每个孔显色时间相同。
2. 标准品的溶解与稀释,严格按说明书要求进行。
a. 粉末标准品短暂离心,让因运输沾到管盖、管壁的标准品沉到管底。
b. 根据瓶标签加入一定体积的蒸馏水(或说明书指定溶液),加水后轻柔涡旋震荡,室温静置溶解10-30分钟,让粉末完全溶解。
注意:加水(或说明书指定溶液)后暂不用移液枪吹吸,避免蛋白未溶解,枪头带出部分蛋白,待完全溶解后可吹吸或涡旋振荡混匀。
3.假阳性结果和假阴性结果
a、标本的采集与保存
当标本采集保存不当产生溶血时,红细胞中的血红蛋白释放到血清中,血红蛋白具有过氧化物酶的性质,其通过吸附或“PP效应”(蛋白质间相互吸附的现象)结合后,可催化A、B液显色而造成假阳性
b、标本采集保存不当致细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,会产生假阳性反应;标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG聚合,易使间接法的试验本底加深。因此,标本宜在新鲜时检测。
c、反复冻融血清会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存做多次检测,宜少量分装冻存。
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