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细胞培养无菌操作基本技术

点击次数:783   发布时间:2019/9/23 9:16:10

     1.实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射30-60分钟灭菌,用70%酒精擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风机运转10分钟后,才可开始实验操作,每次操作只处理一株细胞,以免造成细胞交叉污染,实验结束后,将实验物品带出工作台,如需要继续进行下一个实验,则用70%酒精擦拭无菌操作台面,再让无菌操作台风机运转10分钟后,才可进行下一个实验操作 
 
    2.无菌操作工作区域应保持清洁与宽敞,必要物品,如试管架,移液器或吸管头等可以暂时放置,其它实验用品用完后应及时移出,以利气体流通,实验用品要用70%酒精擦拭后才能带入无菌操作台内,实验操作应在操作台中央无菌区域内进行,勿在边缘非无菌区域操作 
 
    3.小心取出无菌实验用品,避免造成污染,切勿碰触吸管与吸头头部或容器瓶口,不要在打开的容器正上方操作实验,容器打开后,用手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放在台面上
 
    4.工作人员应注意自身的安全,必须穿戴实验衣与手套后才进行实验,对于来自人源性或病毒感染的细胞株应特别小心,并选择适当等级的无菌操作台(至少两级),操作过程中,应避免引起气溶胶的产生,小心有毒性试剂,例如DMSO及TPA等,并避免尖锐物品伤人等
 
    5.定期检查下列项目,CO2钢瓶内的CO2压力,CO2培养箱内的CO2浓度,温度,及水盘是否有污染,无菌操作台内气流压力是否正常,定期更换紫外灯管及HEPA过滤器滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000小时/HEPA)
 

原创作者:上海恒远生物科技有限公司

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