在使用试剂盒操作ELISA方法实验时,我们需要按照说明书中给出的正确方法,如果您是上海恒远生物的客户,在实验中有什么问题的话,您可以直接打电话到我公司来,我们将安排技术人员为您解惑,指导实验。或为您代测。
ELISA实验的这些要求需知您都知晓了吗?
1. 在试用期,应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。
2. 浓缩洗涤液出现结晶后,应于37℃孵育15分钟。
3. 此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。
每个试剂盒说明书中都是有其注意事项的,这里就不一一例举,如果想了解的话也可以来电我公司询问,我们将产品说明书发送给您。下面就是一些实验技术的相关须知:
·准备好所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等;
·根据检测标本数量确定所需试剂的量;
·按说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂;
·标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备,尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存。
实验中为了确定*佳信号和背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时,应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。 标准品的配制:对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节。在使用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。
一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml 到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
为了优化灵敏度,建议过夜孵育标准品和标本。若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。当测定混合液体中的抗原时,如血清,建议在标本稀释液中加不相干的Ig。
了解更多相关ELISA实验要求问题,欢迎您来电咨询我公司业务员。上海恒远供应R&D、TSZ品牌elisa试剂盒,已经得到多大科研机构的认可,安全可靠,提供免费代测,全国包邮给您送货上门。 原创作者:上海恒远生物科技有限公司