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点击次数:4526 发布时间:2012/11/22 13:31:45
进口细胞因子厂家直销
细胞因子溶解方法
细胞因子中不含载体蛋白(Carrier Protein)或其他添加剂(如BSA、HAS或蔗糖等),并且通常以*少量的盐来进行冻干处理,因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内,形成很薄或不可见的蛋白层。所以我们建议在收到产品后,务必在开盖前先离心,使粘在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底(此时能否见到白色沉淀均属正常现象)。
1.离心:高速离心 (10, 000 rpm) 20-30 秒,或低速离心 (2, 000 rpm) 5 分钟。
2.溶解(Reconstitution):用去离子水或其它缓冲液(根据说明书要求进行选择)溶解至说明书要求的浓度 (一般为 0.1-1.0 mg/mL,如10ug的产品,需用10uL-100uL的去离子水或缓冲液溶解)。溶解时不可振荡,避免因化学键的断裂造成蛋白失活,可加入适当的溶剂轻摇并静置一段时间,待细胞因子完全溶解后使用。
溶剂的选择:
1)要求用去离子水溶解的产品,务必不可用盐溶液,避免过高的盐浓度造成蛋白不可逆的析出;
2) 要求用盐溶液溶解的产品,请依照说明书上的浓度,同样也是为了避免过高的盐浓度。
3.分装和贮存(Aliquot and Storage):蛋白溶解后可根据自己的实验需要进一步稀释成工作液,稀释可用RPMI 1640、DMEM或PBS等溶液,其中含有5-10%的FCS (小牛或胎牛血清)或0.5 %的BSA(牛血清白蛋白)来稳定蛋白。工作液在4℃可保存1周,如需长期保存,则需分装冻存于-20℃ (注意:不可冻存于-80℃)。分装时每管中工作液的体积是一次实验的用量,以实现每次实验用完一只工作液,避免反复冻融引起蛋白活性的降低。
上海恒远生物科技有限公司始终致力于为生命科学研究开发重组蛋白及相关产品,如今已成为能提供多种高质量细胞因子和重组蛋白,相应的单克隆、多克隆和生物素标记抗体,以及ELISA试剂盒的世界领导者。
上海恒远产品涵盖免疫调节蛋白、白介素、集落刺激因子、生长因子、化学趋化因子、干扰素、脂联素、成纤维生长因子、转化生长因子、肿瘤坏死因子、神经营养素和防御素等诸多生命科学研究领域中重要的生物活性分子。 为跟踪当今科研发展、满足日益增长的需求,上海恒远研制出无动物成分的重组蛋白 。这些蛋白是利用专有的无动物成分生产设施,在严格的无动物成分条件下生产出来,因此痕量的动物源性污染引发潜在问题的可能性被降至,从而完全达到临床前研究和细胞治疗用标准。此外,上海恒远*新还开发出无动物成分的培养基添加物试剂盒 。这些试剂盒经改良设计,其中的无血清组分对多种哺乳动物细胞的生长有更好的维持能力。
原创作者:上海恒远生物科技有限公司